Krēpu mikrobioloģiskā izmeklēšana

Mikrobioloģiskā izmeklēšana ir vissvarīgākā saikne pneimonijas izraisītāja diagnostiskā meklēšanā un verifikācijā. Tā ietver ne tikai izraisītāja izolēšanu, bet arī tā īpašību izpēti, tostarp jutību pret dažādām zālēm ar baktericīdu un bakteriostatisku iedarbību.

Šim nolūkam tiek izmantota krēpu sēšanas metode uz dažādām barotnēm. Laboratorijā piegādātajā krēpu paraugā atlasa strutainus kunkuļus un rūpīgi mazgā Petri trauciņā ar nātrija hlorīda izotopu šķīdumu, kas zināmā mērā ļauj tos atbrīvot no augšējo elpceļu mikrofloras. Strutaino krēpu kunkuļu sēšana tiek veikta uz dažādām barotnēm, kuru sastāvs ir aprakstīts īpašās mikrobioloģijas rokasgrāmatās. Barotnes ar sēklām inkubē 37,5 °C temperatūrā 24 stundas. No izaudzētajām kolonijām izolē tīrkultūras, tās identificē ar zināmām mikrobioloģiskām metodēm un nosaka to jutību pret antibiotikām.

Lai noteiktu mikroorganismu kvantitatīvo saturu, krēpas homogenizē, sajauc ar barības vielu buljonu un no maisījuma sagatavo desmitkārtīgus atšķaidījumus, kurus inokulē Petri trauciņos ar asins agaru. Pēc 24 stundu inkubācijas 37,5°C temperatūrā ņem vērā rezultātus, saskaitot viena veida kolonijas pēc izskata un ņemot vērā materiāla atšķaidīšanas pakāpi. No kolonijām sagatavo uztriepes un pārbauda mikroskopā.

Rezultātu interpretācija

Krēpu mikrobioloģiskās izmeklēšanas rezultātu interpretācija ir diezgan sarežģīta, ko izskaidro vairāki faktori. Iepriekš jau tika minēts par pastāvīgu bronhu satura iesēšanu ar augšējo elpceļu un mutes dobuma mikrofloru un par biežu vairuma tipiskāko elpceļu slimību izraisītāju (pneimokoku, streptokoku, stafilokoku u.c.) klātbūtni veselu cilvēku normālajā traheobronhu saturā. Šajā sakarā dažādu mikroorganismu asociācijas izolēšana krēpās mikrobioloģisko pētījumu laikā, no kuriem lielākā daļa šajā konkrētajā gadījumā ir oportūnistiski, ārkārtīgi apgrūtina slimības izraisītāja noteikšanu. Tāpēc, lai interpretētu krēpu mikrobioloģiskās izmeklēšanas rezultātus, jāņem vērā konkrēta baktēriju veida kvantitatīvā pārsvars (vairāk nekā 106-107 ^mc/ ml), noteiktu mikroorganismu parādīšanās saasinājuma fāzē un to izzušana remisijas periodā. Ir ļoti svarīgi ņemt vērā slimības klīnisko ainu.

Galvenie un iespējamie dažādu klīnisko pneimonijas formu izraisītāji

Pneimonijas klīniskā forma	Galvenie patogēni	Iespējamie patogēni
Krupuss	Pneimokoki	Streptokoki, Klebsiella
Pēc gripas	Stafilokoki, pneimokoki, klebsiella	Haemophilus influenzae, streptokoki
Abscesēšana	Stafilokoki, bakteroīdi, jaukta flora	Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa
Aspirācija	Bakteroīdi, anaerobi streptokoki	Stafilokoki, pneimokoki
Pēcoperācijas periods	Stafilokoki	Pneimokoki, Klebsiella
Iespiestā reklāma	Mikoplazmas	Ornitozes, psitakozes patogēni
Sekundāra pneimonija slimnīcas pacientiem bez iepriekšējas antibakteriālas terapijas	Stafilokoki, pneimokoki, klebsiella, bakteroīdi	Escherichia coli, serratia utt.
Sekundāra pneimonija, kas attīstījās uz antibakteriālās terapijas fona	Fakultatīvi patogēni mikroorganismi	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus utt.
Pacientiem ar hronisku bronhītu	Pneimokoki, Haemophilus influenzae	Stafilokoki, streptokoki
Pacientiem ar alkoholismu	Pneimokoki, Haemophilus influenzae, Klebsiella	E. coli, vienšūņi
Iegūtā imūndeficīta sindroma gadījumā	Pneimocistitis, sēnītes	Citomegalovīrusi
Pacientiem, kuru aprūpi nodrošina nepiederošas personas	Pneimokoki, stafilokoki, hemofīlas papillas	Klebsiella, Escherichia coli

Kvantitatīvi novērtējot mikrobiālā piesārņojuma pētījuma rezultātus pacientiem ar pneimoniju, jāatceras šī indikatora ārkārtīgi augstā jutība pret antibiotiku izrakstīšanu. Pat īslaicīga ārstēšana ar antibakteriāliem līdzekļiem var izraisīt strauju mikrobiālā piesārņojuma samazināšanos, kas neļauj pienācīgi novērtēt krēpu pētījuma rezultātus. Tāpēc pirms antibiotiku terapijas izrakstīšanas ieteicams savākt krēpas.

Jāatzīmē arī, ka pneimonijas intracelulāro patogēnu (mikoplazmas, legionellas, hlamīdijas, riketsijas) kultivēšanai tiek izmantotas īpašas selektīvas barotnes. Rutīnas mikrobioloģiskā testēšana, izmantojot parastās barotnes (agaru), nekad nedod pozitīvus rezultātus. Tāpēc specifisku mikrobioloģiskās testēšanas metožu izvēle jāveic, piedaloties ārstējošam ārstam, kuram ir pienākums informēt laboratorijas ārstu par savām aizdomām par intracelulāro patogēnu iespējamo lomu pneimonijas rašanās procesā šim pacientam.

Jāpiebilst, ka reālā klīniskajā praksē pat tehniski perfekta krēpu mikrobioloģiskā izmeklēšana ļauj identificēt patogēnu ne vairāk kā 40–60 % gadījumu. Tādēļ patogēna pārbaudei var izmantot citas mūsdienīgas pētījumu metodes. Bakterioloģiskā pētījuma informācijas saturu var ievērojami palielināt, ja par pētāmo bioloģisko materiālu izmanto traheobronhiālo aspirātu, šķidrumu, kas iegūts bronhoalveolārās skalošanas (BAL), bronhoskopijas u. c. laikā, nevis krēpas.

Turklāt pneimonijas izraisītāju identificēšanai var izmantot dažādu bioloģisko materiālu (bronhoskopijas materiāla, asiņu, pleiras satura utt.) imunofluorescences metodi, PCR diagnostikas metodes un specifisko antivielu līmeņa izpēti asins serumā. Diemžēl šīs diagnostikas metodes vēl nav atradušas plašu klīnisko pielietojumu un pašlaik tiek izmantotas tikai lielos specializētos centros un laboratorijās.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]