Trombocītu agregācija ar ristocetīnu (fon Villebranda faktors )

Fon Vilebranda faktora aktivitātes atsauces vērtības (norma) ir 58–166%.

Fon Vilebranda faktoru sintezē endotēlija šūnas un megakariocīti. Tas ir nepieciešams normālai trombocītu adhēzijai un tam piemīt spēja pagarināt VIII faktora pusperiodu. Plazmas koagulācijas VIII faktors - antihemofīlais globulīns A - cirkulē asinīs kā trīs apakšvienību komplekss, kas apzīmētas ar VIII-k (koagulācijas vienība), VIII-Ag (galvenais antigēna marķieris) un VIII-vWF (fon Vilebranda faktors, kas saistīts ar VIII-Ag). Tiek uzskatīts, ka fon Vilebranda faktors regulē antihemofīlā globulīna A (VIII-k) koagulācijas daļas sintēzi un ir iesaistīts asinsvadu-trombocītu hemostāzē.

Fon Vilebranda slimība ir iedzimta slimība, kam raksturīgs palielināts asiņošanas laiks, samazināta ristocetīna kofaktora aktivitāte un samazināta (dažādā pakāpē) VIII faktora koagulanta aktivitāte. Slimības klīniskās izpausmes ir līdzīgas trombocitopātijas pazīmēm. Tomēr pacientiem ar ievērojamu VIII faktora aktivitātes samazināšanos var rasties hematomas un hemartroze.

Pamatojoties uz laboratorijas pētījumiem, kas ļauj noteikt fon Vilebranda faktora struktūru un aktivitāti, izšķir šādas slimības formas.

• I tipam (70% no visiem gadījumiem) raksturīga neliela ristocetīna kofaktora (fon Vilebranda faktora) un koagulanta aktivitātes (VIII-k) samazināšanās ar normālu fon Vilebranda faktora makromolekulāro struktūru.
• II tips: balstās uz selektīvu fon Vilebranda faktora augstmolekulāro polimēru deficītu, ko izraisa traucējumi šī proteīna struktūrā.
  • IIB tipu izraisa pastiprināta mijiedarbība starp fon Vilebranda faktoru un trombocītiem, un palielināta trombocītu agregātu klīrenss izraisa trombocitopēniju.
• III tipu raksturo smags kvantitatīvs fon Vilebranda faktora deficīts, kā rezultātā klīniski nozīmīgi samazinās VIII faktora (VIII-k) aktivitāte.

Fon Vilebranda faktora saturu nosaka gadījumos, kad ir palielināts asiņošanas laiks, trombocītu skaits ir atsauces vērtību robežās un nav acīmredzamu trombocītu disfunkcijas cēloņu. Lai novērtētu fon Vilebranda faktoru, tiek noteikts fon Vilebranda faktora kvantitatīvais saturs (ristocetīna kofaktora aktivitātes pētījums), tiek pētīta ristocetīna izraisīta trombocītu aglutinācija un ar VIII faktoru saistītā fon Vilebranda faktora antigēnā struktūra (VIII-vWF).

Trombocītu agregācijas noteikšana ar ristocetīnu plazmā tiek izmantota fon Vilebranda faktora kvantitatīvai novērtēšanai. Ir konstatēta lineāra sakarība starp ristocetīna agregācijas pakāpi un fon Vilebranda faktora daudzumu. Metode balstās uz šīs antibiotikas (ristocetīna) spēju stimulēt fon Vilebranda faktora mijiedarbību ar trombocītu glikoproteīnu Ib in vitro. Vairumā fon Vilebranda slimības gadījumu tiek novērota traucēta ristocetīna agregācija ar normālu reakciju uz ADP, kolagēnu un adrenalīnu. Traucēta ristocetīna agregācija tiek konstatēta arī Bernāra-Suljē makrocītiskās trombodistrofijas gadījumā (ristocetīna agregācijas receptoru neesamība trombocītu membrānā). Diferencēšanai tiek izmantots tests ar normālas plazmas pievienošanu: fon Vilebranda slimības gadījumā ristocetīna agregācija normalizējas pēc normālas plazmas pievienošanas, savukārt tas nenotiek Bernāra-Suljē sindroma gadījumā.

Pētījumu var izmantot arī hemofilijas A (VIII faktora deficīta) un fon Vilebranda slimības diferenciāldiagnozē. Hemofilijas gadījumā VIII-k saturs ir strauji samazināts, un VIII-fB saturs ir normas robežās. Klīniski šī atšķirība izpaužas ar to, ka hemofilijas gadījumā rodas hematomas tipa pastiprināta asiņošana, bet fon Vilebranda slimības gadījumā - petehiālas hematomas tipa.

Ristocetīna izraisītā trombocītu aglutinācija vairumā fon Vilebranda slimības gadījumu, izņemot IIB tipu, ir samazināta.

Ar VIII faktoru saistītā fon Vilebranda faktora (VIII-vWF) antigēnā struktūra tiek noteikta ar dažādām imunoloģiskām metodēm, un fon Vilebranda faktora sadalījums pēc molekulārā lieluma tiek noteikts ar agarozes gela elektroforēzi. Šie testi tiek izmantoti, lai noteiktu fon Vilebranda slimības veidu.

Trombocītu agregācijas pētījums ar dažādiem induktoriem tiek veikts ne tikai, lai identificētu trombocītu agregācijas funkciju traucējumus. Šis pētījums ļauj novērtēt antiagregantu terapijas efektivitāti, izvēlēties individuālas zāļu devas un veikt zāļu monitoringu.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]