Visi iLive saturs ir medicīniski pārskatīts vai pārbaudīts, lai nodrošinātu pēc iespējas lielāku faktisko precizitāti.
Mums ir stingras iegādes vadlīnijas un tikai saikne ar cienījamiem mediju portāliem, akadēmiskām pētniecības iestādēm un, ja vien iespējams, medicīniski salīdzinošiem pārskatiem. Ņemiet vērā, ka iekavās ([1], [2] uc) esošie numuri ir klikšķi uz šīm studijām.
Ja uzskatāt, ka kāds no mūsu saturiem ir neprecīzs, novecojis vai citādi apšaubāms, lūdzu, atlasiet to un nospiediet Ctrl + Enter.
Polimerāzes ķēdes reakcija (PCR) infekcijas slimību diagnostikā
Raksta medicīnas eksperts
Pēdējā pārskatīšana: 05.07.2025
PCR ir viena no DNS diagnostikas metodēm, kas ļauj, izmantojot enzīmu DNS polimerāzi, miljoniem reižu palielināt atklātā baktēriju vai vīrusu genoma (DNS) posma kopiju skaitu. Testējamais dotajam genomam specifiskais nukleīnskābes posms tiek daudzkārt reizināts (amplificēts), kas ļauj to identificēt. Vispirms baktēriju vai vīrusu DNS molekula tiek sadalīta divās ķēdēs, karsējot, pēc tam sintezētu DNS praimeru klātbūtnē (nukleotīdu secība ir specifiska nosakāmajam genomam) tie saistās ar komplementāriem DNS posmiem, un pēc katra praimera termostabilas DNS polimerāzes klātbūtnē tiek sintezēta otrā nukleīnskābes ķēde. Tiek iegūtas divas DNS molekulas. Process tiek atkārtots daudzas reizes. Diagnostikai pietiek ar vienu DNS molekulu, t.i., vienu baktēriju vai vīrusa daļiņu. Papildu posma ieviešana reakcijā - DNS sintēze uz RNS molekulas, izmantojot enzīmu reversās transkriptāzes - ļāva testēt RNS vīrusus, piemēram, HCV vīrusu. PCR ir trīs posmu process, kas cikliski atkārtojas: denaturācija, praimera atkvēlināšana, DNS sintēze (polimerizācija). Sintezētā DNS daudzums tiek identificēts ar ELISA vai elektroforēzes palīdzību.
PCR var izmantot dažādus bioloģiskos materiālus – asins serumu vai plazmu, urīnizvadkanāla nokasīšanu, biopsiju, pleiras šķidrumu, cerebrospinālo šķidrumu utt. PCR galvenokārt izmanto, lai diagnosticētu infekcijas slimības, piemēram, vīrusu hepatītu B, vīrusu hepatītu C, vīrusu hepatītu D, CMV infekciju, seksuāli transmisīvās infekcijas (gonoreju, hlamīdijas, mikoplazmu, ureaplazmas infekcijas), tuberkulozi, HIV infekciju utt.
PCR priekšrocība infekcijas slimību diagnostikā salīdzinājumā ar citām pētījumu metodēm ir šāda:
- infekcijas izraisītāju var noteikt jebkurā organisma bioloģiskajā vidē, ieskaitot biopsijas laikā iegūto materiālu;
- infekcijas slimības ir iespējams diagnosticēt agrīnākajās slimības stadijās;
- ir iespējams kvantitatīvi novērtēt pētījuma rezultātus (cik daudz vīrusu vai baktēriju ir pētāmajā materiālā);
- metodes augstā jutība; piemēram, PCR jutība B hepatīta vīrusa DNS noteikšanā asinīs ir 0,001 pg/ml (aptuveni 4×10⁻² kopijas /ml), savukārt DNS hibridizācijas metodes jutība, izmantojot sazarotas zondes, ir 2,1 pg/ml (aptuveni 7×10⁻¹ kopijas /ml).
[