Antibiotiku jutības pārbaude: sagatavošana, atšifrēšana, cik daudz tiek darīts

Mūsdienās antibiotiku jutības testi kļūst arvien populārāki. Cilvēka mikroflora ir diezgan daudzveidīga, to pārstāv liels skaits mikroorganismu dažādos biotopos.

Farmācijas uzņēmumi ir izstrādājuši lielu skaitu antibakteriālu līdzekļu – antibiotiku, kas palīdz uzturēt normālu mikrobu populāciju attiecību un skaitu. Sākoties antibiotiku ērai, daudzas slimības, kas iepriekš tika uzskatītas par letālām, ir izārstētas. Taču arī mikroorganismi cenšas izdzīvot, pakāpeniski pielāgojoties antibakteriālo zāļu iedarbībai. Laika gaitā daudzi no tiem ir ieguvuši rezistenci pret daudzām zālēm, nostiprinājuši to genotipā un sākuši nodot no paaudzes paaudzē. Tādējādi jauni mikroorganismi sākotnēji ir nejutīgi pret noteiktām zālēm, un to lietošana var būt neefektīva. Farmaceiti izstrādā arvien jaunus produktus, pievienojot tiem jaunas aktīvās sastāvdaļas, mainot pamatformulu. Taču pakāpeniski attīstās arī rezistence pret tiem.

Paaugstinātas mikrofloras rezistences iemesls pret daudzām zālēm un pat to analogiem bieži vien slēpjas nepareizā un nekontrolētā antibiotiku lietošanā. Ārsti izraksta antibiotikas un to kombinācijas dažādu bakteriālu slimību gadījumā. Tajā pašā laikā netiek veikts sākotnējs novērtējums par to efektivitāti, netiek izvēlēta optimālā deva, kas ir ļoti svarīgi gan ārstēšanai, gan turpmākas rezistences attīstības mehānismu novēršanai. Daudzi cilvēki kļūdaini izraksta antibakteriālu terapiju pat vīrusu slimību gadījumā, kas ir neefektīva, jo antibiotika neiedarbojas pret vīrusiem.

Terapija bieži tiek nozīmēta bez iepriekšējas jutības pārbaudes, netiek veikta aktīvās vielas un nepieciešamās devas izvēle katrai konkrētai slimībai un biotopam. Tā kā antibiotikas tiek izrakstītas "akli", bieži vien ir gadījumi, kad tās neuzrāda nekādu aktivitāti pret mikroorganismiem, kas izraisīja slimību un kuru skaits ir jāsamazina. Tā vietā tās ietekmē citus mikrofloras pārstāvjus, kā rezultātā rodas disbakterioze, kas arī ir diezgan bīstama patoloģija un var izraisīt nopietnas sekas. Īpaši bīstami ir gadījumi, kad antibiotika iznīcina normālo mikrofloru, kuras uzdevums ir aizsargāt organismu un uzturēt tā normālu darbību. Ir arī gadījumi, kad tiek nozīmēts pārāk daudz vai pārāk maz zāļu.

Pacienti arī ir bezatbildīgi attiecībā uz ārstēšanu. Bieži vien ārstēšana tiek pārtraukta pēc tam, kad slimības simptomi vairs netraucē. Tajā pašā laikā daudzi izvēlas nepabeigt pilnu kursu. Tas ir viens no faktoriem, kas veicina baktēriju rezistences attīstību. Pilns kurss ir paredzēts, lai pilnībā iznīcinātu patogēno mikrofloru. Ja kurss netiek pabeigts, tas netiek pilnībā iznīcināts. Tie mikroorganismi, kas izdzīvo, piedzīvo mutācijas, attīsta mehānismus, kas nodrošina tiem aizsardzību pret šīm zālēm, un nodod tās nākamajām paaudzēm. Bīstamība ir tāda, ka rezistence attīstās ne tikai pret šīm konkrētajām zālēm, bet arī pret visu zāļu grupu.

Tāpēc mūsdienās viens no visefektīvākajiem racionālas terapijas un rezistences novēršanas līdzekļiem ir iepriekšēja jutības noteikšana pret izrakstītajām zālēm un tās optimālās devas izvēle.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]

Norādes uz procedūru jutības pret antibiotikām testi

Parasti šāda analīze jāveic visos gadījumos, kad nepieciešama antibakteriāla terapija. Pamatojoties uz antibiotiku terapijas pamatlikumiem, jebkuru antibiotiku var izrakstīt tikai pēc tam, kad ir veikta mikrofloras jutības pret šo līdzekli iepriekšēja novērtēšana un laboratorijas apstākļos noteikta optimālā aktīvās vielas koncentrācija. Praksē dažādu iemeslu un apstākļu dēļ šāds pētījums pirms ārstēšanas sākuma netiek veikts, un ārsts ir spiests izvēlēties zāles "nejauši".

Mūsdienās jutīguma testēšana tiek veikta tikai gadījumos, kad ārstam ir nopietnas šaubas par izrakstīto zāļu efektivitāti, ilgstošas zāļu iedarbības trūkuma gadījumos, kā arī atkārtoti lietojot vienas un tās pašas zāles ierobežotā laika periodā. Jūtību bieži nosaka seksuāli transmisīvo slimību ārstēšanā. Daudzi speciālisti vēršas pie analīzēm blakusparādību, alerģisku reakciju gadījumā un tad, ja nepieciešams aizstāt vienas zāles ar citām.

Analīzi bieži izmanto arī, lai izvēlētos zāles antibakteriālai terapijai atveseļošanās periodā pēc operācijām, laparoskopiskām intervencēm un orgānu izņemšanas. Ķirurģijas un strutainas ķirurģijas nodaļās šāds pētījums ir vienkārši nepieciešams, jo šeit rezistence attīstās diezgan ātri. Turklāt attīstās superrezistentas "slimnīcā iegūtas". Daudzas privātās klīnikas zāļu izrakstīšanu uztver ar pilnu atbildību - tikai pēc jutīguma pārbaudes. Daudzos gadījumos valsts iestāžu budžets vienkārši neļauj veikt šādus pētījumus katram pacientam, kuram nepieciešama antibakteriāla terapija.

[ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Sagatavošana

Gatavošanās pētījumam neprasa nekādus īpašus pasākumus. Tā ir tāda pati kā jebkuru analīžu veikšanai. Dažas dienas pirms pētījuma jāatturas no alkohola lietošanas. No rīta, materiāla savākšanas dienā, vairumā gadījumu nedrīkst ēst un dzert. Bet viss ir atkarīgs no analīzes veida. Pētījuma materiāls var atšķirties atkarībā no slimības.

Rīkles un elpceļu slimību gadījumā ņem rīkles un deguna uztriepi. Veneroloģijā, ginekoloģijā, uroloģijā analīzei ņem dzimumorgānu uztriepi un asinis. Nieru slimību gadījumā bieži nepieciešams urīns. Kuņģa-zarnu trakta slimību un dažu infekcijas slimību gadījumā analizē fekālijas un vemšanu. Dažreiz var izmeklēt mātes pienu, deguna izdalījumus, acu sekrētu, siekalas un krēpas. Smagu patoloģiju gadījumā un aizdomu par infekcijas procesu gadījumā analizē pat cerebrospinālo šķidrumu. Spektrs ir diezgan plašs.

Materiāla savākšanas īpatnības nosaka tā bioloģiskā piederība. Tādējādi urīns un fekālijas tiek savāktas no rīta tīrā traukā vai speciālā bioloģiskajam materiālam paredzētā traukā. Mātes piens tiek savākts pirms barošanas. Vidējā daļa tiek ņemta pārbaudei. Uztriepe tiek savākta, izmantojot speciālu tamponu, kas tiek pārvietots pa gļotādu, pēc tam ievietots mēģenē ar sagatavotu barotni. Asinis tiek savāktas mēģenē no pirksta vai vēnas. Savācot uztriepes no urīnizvadkanāla vai maksts, ieteicams vairākas dienas atturēties no dzimumakta.

Vācot bioloģisko materiālu pētījumiem, vispirms ir jānodrošina pareiza savākšana un sterilitāte. Taču vairumā gadījumu tā ir medicīnas personāla problēma, pacientam par to nevajadzētu uztraukties. Visbiežāk šādiem pētījumiem pievēršas ginekologi un urologi, otrajā vietā - otolaringologi nazofarneksa un rīkles, augšējo elpceļu slimību ārstēšanā.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Tehnika jutības pret antibiotikām testi

Savāktais bioloģiskais materiāls tiek nogādāts laboratorijā sterilos apstākļos, kur tiek veikti turpmāki pētījumi. Vispirms tiek veikta tā primārā sēšana uz universālām barotnēm. Daļa materiāla tiek ņemta arī mikroskopiskai izmeklēšanai. Tiek sagatavota uztriepe mikroskopijai, veikts pētījums, ar kura palīdzību var noteikt aptuvenu ainu, pieņemt, kādi mikroorganismi atrodas paraugā. Tas ļauj izvēlēties optimālāko vidi tālākai izpētei un mikroorganismu identificēšanai. Mikroskopijā var redzēt arī pazīmes, kas liecina par iekaisumu, onkoloģisku procesu.

Vairāku dienu laikā Petri trauciņā aug mikroorganismu kolonijas. Pēc tam tiek paņemtas vairākas kolonijas un pārvietotas uz selektīvām barotnēm, kas ļauj noteikt aptuvenu mikroorganismu grupu. Tās vairākas dienas inkubē termostatā, un pēc tam sākas identifikācija (mikroorganisma veida noteikšana). Identifikācija tiek veikta, izmantojot īpašus bioķīmiskos un ģenētiskos testus, identifikatorus. Papildus var veikt imunoloģiskos pētījumus.

Pēc galvenā patogēna izolēšanas tiek novērtēta tā jutība pret antibiotikām. Šim nolūkam ir vairākas metodes. Visbiežāk izmantotā metode ir sērijveida atšķaidīšana jeb disku difūzijas metode. Metodes ir sīki aprakstītas mikrobioloģiskajās uzziņu grāmatās, vadlīnijās un laboratorijas standartos.

Disku difūzijas metodes būtība ir tāda, ka identificētie mikroorganismi tiek iesēti uz barības barotnes, un virsū tiek uzlikti speciāli diski, kas samērcēti antibiotikās. Sējumu vairākas dienas inkubē termostatā, pēc tam mēra rezultātus. Tiek novērtēta katras antibiotikas baktēriju augšanas inhibīcijas pakāpe. Ja baktērija ir jutīga pret antibiotiku, ap disku veidojas "līzes zona", kurā baktērijas nevairojas. To augšana ir lēna vai vispār nav. Augšanas inhibīcijas zonas diametrs tiek izmantots, lai noteiktu mikroorganisma jutības pakāpi pret antibiotiku un formulētu turpmākus ieteikumus.

Visprecīzākā ir sērijveida atšķaidīšanas metode. Šim nolūkam mikroorganismus iesēj šķidrā barības vielu vidē, pievieno antibiotiku, kas atšķaidīta saskaņā ar decimālo atšķaidīšanas sistēmu. Pēc tam mēģenes ievieto termostatā inkubācijai uz vairākām dienām. Jutību pret antibiotikām nosaka baktēriju augšanas pakāpe barības vielu buljonā, pievienojot antibiotikas. Tiek reģistrēta minimālā koncentrācija, pie kuras mikroorganismi joprojām aug. Šī ir minimālā zāļu deva (nepieciešama pārrēķins no mikrobioloģiskajām vienībām uz aktīvo vielu).

Šīs ir standarta mikrobioloģiskās metodes, kas veido jebkura pētījuma pamatu. Tās paredz visu manipulāciju manuālu veikšanu. Mūsdienās daudzas laboratorijas ir aprīkotas ar speciālu aprīkojumu, kas visas šīs procedūras veic automātiski. Speciālistam, kas strādā ar šādu aprīkojumu, ir nepieciešama tikai spēja strādāt ar aprīkojumu, drošības un sterilitātes noteikumu ievērošana.

Jāņem vērā, ka jutības rādītāji laboratorijas apstākļos un dzīvos organismos ievērojami atšķiras. Tāpēc cilvēkam tiek noteikta lielāka deva nekā noteikta pētījuma laikā. Tas ir saistīts ar faktu, ka organismā nav tik optimālu apstākļu baktēriju augšanai. Laboratorijā tiek radīti "ideāli apstākļi". Daļu zāļu var neitralizēt siekalu, kuņģa sulas iedarbība. Daļu asinīs neitralizē antivielas un antitoksīni, ko ražo imūnsistēma.

Urīna antibiotiku jutības tests

Vispirms tiek savākts bioloģiskais materiāls. Lai to izdarītu, jums jāsavāc rīta urīna vidējā daļa un jānogādā tā laboratorijā. Ir svarīgi ievērot sterilitāti un nelietot antibiotikas vairākas dienas pirms analīzes, pretējā gadījumā var iegūt viltus negatīvu rezultātu. Pēc tam tiek veikta standarta sēšana, kuras būtība ir izolēt patogēna tīrkultūru un izvēlēties antibiotiku, kurai būs optimāla baktericīda iedarbība uz to. Tiek noteikta nepieciešamā antibiotikas koncentrācija.

Urīna analīze visbiežāk tiek noteikta, ja ir aizdomas par infekcijas un iekaisuma procesu uroģenitālajā sistēmā, ar imūndeficītu un vielmaiņas traucējumiem. Parasti urīns ir sterils šķidrums. Šāda pētījuma ilgums ir 1-10 dienas, un to nosaka mikroorganisma augšanas ātrums.

Kultūras un antibiotiku jutības pārbaude

Pētījums ietver patogēna mikroorganisma izolēšanu tīrkultūrā. Dažreiz var būt vairāki šādi mikroorganismi (jaukta infekcija). Daži mikroorganismi spēj veidot bioplēves, kas ir sava veida "mikrobu kopienas". Bioplēvju izdzīvošanas rādītājs ir daudz augstāks nekā atsevišķiem mikroorganismiem vai asociācijām. Turklāt ne visas antibiotikas spēj ietekmēt bioplēvi un iekļūt tajā.

Lai noteiktu patogēnu, izolētu to tīrkultūrā, veic sēšanu. Pētījuma laikā tiek veiktas vairākas sēšanas dažādās barības vielu vidēs. Pēc tam tiek izolēta tīrkultūra, noteikta tās bioloģiskā piederība un jutība pret antibakteriāliem līdzekļiem. Tiek izvēlēta optimālā koncentrācija.

Pētījumam var izmantot jebkuru bioloģisko materiālu atkarībā no slimības un infekcijas procesa lokalizācijas. Ilgumu nosaka mikroorganismu augšanas ātrums.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Fekāliju jutīguma tests

Fēces tiek pārbaudītas dažādu kuņģa un zarnu slimību gadījumā, ja ir aizdomas par infekcijas procesu, bakteriālu intoksikāciju, saindēšanos ar pārtiku. Pētījuma mērķis ir izolēt patogēnu un izvēlēties tam optimālus antibakteriālus līdzekļus, kuriem būs augsta aktivitāte. Šāda veida pētījuma nozīme ir tāda, ka ir iespējams izvēlēties zāles, kas iedarbosies tikai uz patogēnu un neietekmēs normālās mikrofloras pārstāvjus.

Pirmais un ļoti svarīgais posms ir fekāliju savākšana. Tās jāsavāc speciālā sterilā traukā no rīta. Tās jāuzglabā ne ilgāk kā 1-2 stundas. Sievietēm ar menstruāciju analīžu veikšanu vajadzētu atlikt līdz beigām, jo mainīsies rezultātu precizitāte. Materiāls tiek nogādāts laboratorijā testēšanai. Analīze tiek veikta, izmantojot standarta mikrobioloģiskās metodes - tīrkultūras sēšanu un izolēšanu. Tiek veikta arī antibiograma. Pamatojoties uz secinājumu, tiek izstrādāti ieteikumi un noteikta turpmākā pētījuma shēma.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Disbakteriozes analīze ar jutību

Pētījuma materiāls ir fekālijas, kas tiek ņemtas tūlīt pēc defekācijas akta. Normālā kuņģa-zarnu trakta mikroflora sastāv no normālās floras pārstāvjiem un vairākiem patogēnās floras pārstāvjiem. To sugu sastāvs, daudzums un attiecība ir stingri noteikts un tiek turētas pieļaujamās normas robežās. Ja šī attiecība ir traucēta, attīstās disbakterioze. Tā var izpausties dažādi. Infekcijas slimības var attīstīties, ja patogēnās mikrofloras daudzums strauji palielinās. Ja jebkura mikroorganisma daudzums strauji samazinās, brīvo vietu aizņem citi pārstāvji, kas nav tipiski kuņģa-zarnu traktam jeb ir patogēni. Bieži vien brīvo vietu aizņem sēnīte, tad attīstās dažādas sēnīšu infekcijas un kandidoze.

Lai noteiktu zarnu mikrofloras kvantitatīvo un kvalitatīvo sastāvu, tiek veikta fekāliju analīze disbakteriozes noteikšanai. Tradicionāli visi zarnās dzīvojošie pārstāvji tiek iedalīti trīs grupās: patogēnie, oportūnistiskie un nepatogēnie. Attiecīgi analīze sastāv no trim daļām. Katrai mikroorganismu grupai ir savas vajadzības pēc barības avota, enerģijas. Katrai grupai nepieciešamas atsevišķas barības vielas un selektīvas piedevas.

Vispirms tiek veikta mikroskopija un primārā sēšana. Pēc sēšanas tiek atlasītas lielākās kolonijas, kuru morfoloģiskās īpašības ir līdzīgas katras grupas pārstāvjiem. Tās tiek pārnestas uz selektīvām barotnēm. Pēc mikroorganismu paaugšanās tie tiek identificēti un nekavējoties pārbaudīti uz jutību pret antibiotikām. Tiek izmantotas standarta mikrobioloģiskās metodes.

Patogēno mikroorganismu grupas izpēte, papildus standarta pētījumiem, ietver vēdertīfa, paratīfa un dizentērijas baktēriju noteikšanu. Tiek arī noteikts, vai cilvēks ir šo mikroorganismu nesējs. Visaptverošs disbakteriozes pētījums ietver arī bifidobaktēriju un laktobacilu grupas pārstāvju izpēti. Pētījums ilgst apmēram nedēļu un ir atkarīgs no mikroorganismu augšanas ātruma.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ]

Bakteriofāgu jutības pārbaude

Zarnu infekcijas gadījumā bakteriofāgi bieži tiek izmantoti ārstēšanai antibiotiku vietā. Bakteriofāgi ir baktēriju vīrusi, kas ir uzņēmīgi tikai pret tām. Tie atrod baktēriju, ar kuru tie ir komplementāri, iekļūst tajā un pakāpeniski iznīcina baktēriju šūnu. Rezultātā infekcijas process apstājas. Taču ne visas baktērijas ir jutīgas pret bakteriofāgiem. Lai pārbaudītu, vai konkrētais bakteriofāgs uzrādīs aktivitāti pret mikrofloras pārstāvjiem, jāveic analīze.

Pētījuma materiāls ir fekālijas. Analīze jānogādā laboratorijā stundas laikā, pretējā gadījumā to nebūs iespējams veikt. Analīze jāveic vairākos atkārtojumos. Sākotnējā metode ir līdzīga tai, kā nosaka jutību pret antibiotikām. Vispirms tiek veikta parauga sākotnējā mikroskopija, pēc tam primārā sēšana uz universālām barotnēm. Pēc tam tīrkultūra tiek izolēta uz selektīvām barotnēm.

Galvenais darbs tiek veikts ar tīrkultūru. Tās tiek apstrādātas ar dažāda veida bakteriofāgiem. Ja kolonija izšķīst (lizējas), tas norāda uz bakteriofāga augstu aktivitāti. Ja līze ir daļēja, bakteriofāgs darbojas mēreni. Ja līzes nav, var runāt par rezistenci pret bakteriofāgu.

Fāgu terapijas priekšrocība ir tā, ka bakteriofāgi neietekmē cilvēka organismu un neizraisa blakusparādības. Tie piesaistās noteikta veida baktērijām un tās lizē. Trūkums ir tas, ka tie ir ļoti specifiski un tiem ir selektīva iedarbība, un tie ne vienmēr var piesaistīties baktērijām.

[ 30 ], [ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ], [ 36 ], [ 37 ], [ 38 ]

Krēpu analīze antibiotiku jutības noteikšanai

Analīze ir apakšējo elpceļu izdalījumu pētījums. Mērķis ir noteikt mikroorganismu veidu, kas darbojas kā slimības izraisītājs. Tiek veikta arī antibiograma. Šajā gadījumā tiek noteikta patogēna jutība pret antibiotikām un izvēlēta optimālā koncentrācija. To lieto elpceļu slimību gadījumā.

Krēpu un cita plaušu un bronhu satura izmeklēšana ir nepieciešama ārstēšanas režīma izvēlei un dažādu diagnožu diferencēšanai. To izmanto, lai apstiprinātu vai atspēkotu tuberkulozes klātbūtni.

Vispirms ir nepieciešams iegūt bioloģisko materiālu. To var iegūt, klepojot, atkrēpojot vai paņemot to no trahejas bronhoskopijas laikā. Ir speciāli aerosoli, kas veicina atkrēpošanu. Pirms krēpu ņemšanas mute jāizskalo ar ūdeni, kas samazinās mutes dobuma bakteriālā piesārņojuma pakāpi. Vispirms ieteicams 3 reizes dziļi ieelpot un izraisīt produktīvu klepu. Krēpas var ņemt arī ar aspirāciju no trahejas. Šajā gadījumā trahejā tiek ievietots speciāls katetrs. Bronhoskopijas laikā bronhu dobumā tiek ievietots bronhoskops. Šajā gadījumā gļotāda tiek ieeļļota ar anestēzijas līdzekli.

Pēc tam materiāls tiek nosūtīts uz laboratoriju testēšanai. Tiek veikta standarta sēšana un mikroskopija. Pēc tam tiek izolēta tīrkultūra un ar to tiek veiktas turpmākas manipulācijas. Tiek veikta antibiograma, kas ļauj identificēt baktēriju jutības spektru un izvēlēties optimālo devu.

Ja ir aizdomas par tuberkulozi, rīta krēpas tiek pārbaudītas trīs dienas. Pārbaudot tuberkulozi, rezultāts būs gatavs 3-4 nedēļu laikā. Tā kā slimības izraisītājs ir mikobaktērija tuberkuloze, tā aug ļoti lēni.

Parasti jānosaka elpceļu normālas mikrofloras pārstāvji. Jāņem vērā arī tas, ka ar samazinātu imunitāti normālās mikrofloras rādītāji var atšķirties.

Spermas analīze antibiotiku jutības noteikšanai

Tā ir spermas ejakulāta bakterioloģiska izpēte, kam seko jutīgu antibiotiku un to koncentrāciju atlase. Visbiežāk to veic neauglības un citu vīriešu reproduktīvās sistēmas slimību ārstēšanā. Gadījumā, ja slimību pavada infekcijas process. Galvenais vīriešu neauglības cēlonis vairumā gadījumu ir infekcija. Parasti sākotnēji tiek veikta spermogramma. Pamatojoties uz rezultātiem, tiek noteikta spermas apaugļošanās spēja. Ja šajā analīzē tiek konstatēts liels skaits leikocītu, mēs varam runāt par iekaisuma procesu. Šajā gadījumā parasti nekavējoties tiek nozīmēta mikrobioloģiskā analīze, jo iekaisumu gandrīz vienmēr pavada infekcija. Pamatojoties uz iegūtajiem rezultātiem, tiek izvēlēta atbilstoša terapija. Pētījumu parasti nozīmē andrologs.

Analīzes veikšanas iemesli ir arī prostatīts un venerālās slimības. Tā tiek nozīmēta arī tad, ja partnerim tiek atklāta veneriskā slimība.

Pareizas analīzes pamatā, pirmkārt, ir pareiza bioloģiskā materiāla savākšana. Materiāls tiek savākts īpašos traukos ar platu kaklu. Uzglabāšanas temperatūrai jāatbilst cilvēka ķermeņa temperatūrai. Šajā gadījumā materiālu var uzglabāt ne ilgāk kā stundu. Saldētā veidā to var uzglabāt ne ilgāk kā dienu. Nav ieteicams veikt kultūru antibiotiku lietošanas laikā, jo tas maina klīnisko ainu. Parasti kultūra tiek ņemta pirms antibiotiku terapijas kursa uzsākšanas. Vai arī pārtrauciet zāļu lietošanu 2-3 dienas pirms analīzes.

Tad to sēj uz barības vielas. Inkubē termostatā 1-2 dienas. Pēc tam izolē tīrkultūru, tad veic identifikāciju, nosaka jutību, kā arī katras kolonijas veidu un augšanas ātrumu. Jutību pret antibiotikām nosaka, ja tiek atklāti patogēni mikroorganismi. Vidēji analīze ilgst 5-7 dienas.

[ 39 ], [ 40 ], [ 41 ], [ 42 ], [ 43 ]

Glutēna jutības tests

Ir daudz testu, ko var izmantot, lai noteiktu imunoloģisko jutību pret dažādām vielām vai patogēniem. Iepriekš galvenā metode bija testu veikšana, kuru pamatā bija antivielu un antigēnu aglutinācijas reakcija. Mūsdienās šos testus izmanto arvien retāk, jo to jutība ir daudz zemāka nekā daudzām mūsdienu metodēm, piemēram, glutēna testiem. Visbiežāk praksē glutēna un fekāliju analīzei izmanto siekalu testu.

Glutēna jutības tests tiek izmantots dažādu zarnu trakta slimību diagnosticēšanai. Tas balstās uz imūnsistēmas reakciju. Ja izkārnījumiem pievieno glutēnu, reakcija notiek vai arī tās nav. Tas tiek uzskatīts par viltus pozitīvu vai viltus negatīvu rezultātu. Pozitīvs rezultāts norāda uz noslieci uz kolītu, augstu tā attīstības varbūtību. Tas arī apstiprina celiakiju.

Tāpat ir iespējams veikt glutēna testu, izmantojot siekalas kā bioloģisko materiālu. Ir iespējams izmērīt antivielu daudzumu pret gliadīnu. Pozitīvs rezultāts norāda uz jutību pret glutēnu. Tas var liecināt par augstu diabēta iespējamību. Ja abi testi ir pozitīvi, var apstiprināt diabētu vai celiakiju.

[ 44 ], [ 45 ]

Hlamīdiju jutības tests pret antibiotikām

Analīze tiek veikta uroģenitālā trakta infekcijas un iekaisuma slimību ārstēšanā, ja ir aizdomas par hlamīdijām. Pētījuma materiāls ir nokasījums no maksts gļotādas sievietēm un uztriepe no urīnizvadkanāla vīriešiem. Savākšana tiek veikta procedūru telpā, izmantojot vienreizējās lietošanas aprīkojumu. Ir svarīgi ievērot sterilitāti. Pirms materiāla savākšanas 1-2 dienas pirms pētījuma sākuma jāatturas no intīmām attiecībām. Ja sievietei ir menstruācijas, materiāls tiek savākts 3 dienas pēc to pilnīgas beigām.

Materiāls tiek nogādāts laboratorijā. Pilnīga analīze ietver uztriepes sākotnējo mikroskopiju. Tas ļauj vizuāli noteikt mikrofloru pēc morfoloģiskajām pazīmēm un pareizi izvēlēties barības vielas. Gļotu, strutu un epitēlija daļiņu saturs var tieši vai netieši norādīt uz iekaisuma procesa attīstību vai ļaundabīgu šūnu deģenerāciju.

Pēc tam tiek veikta primārā sēšana. Kultūra tiek inkubēta vairākas dienas termostatā, un identifikācija tiek veikta, pamatojoties uz kultūras īpašībām. Pēc tam kultūra tiek pārnesta uz selektīvām barotnēm, kas paredzētas hlamīdiju kultivēšanai. Iegūtās kolonijas tiek identificētas, izmantojot bioķīmiskos testus. Pēc tam, izmantojot standarta metodes, tiek noteikta jutība pret antibiotikām. Tiek izvēlēta jutīgākā antibiotika un tās koncentrācija. Hlamīdiju kultivēšanai ir nepieciešamas īpašas barotnes, kas izstrādātas tieši šāda veida mikroorganismiem un satur visas nepieciešamās vielas un augšanas faktorus.

Ir iespējams veikt arī pētījumu, izmantojot bioloģisko metodi. Šim nolūkam žurkas tiek inficētas ar patogēnu. Dažās laboratorijās žurku vietā tiek izmantota speciāli audzēta audu kultūra. Tas ir saistīts ar faktu, ka hlamīdijas ir intracelulāri parazīti, un to kultivēšanai nepieciešami īpaši apstākļi. Pēc tam mikroorganismus nosaka, izmantojot PCR metodi. Lai noteiktu jutību, tos pārstāda uz selektīvu barotni hlamīdijām, un pēc dažām dienām reģistrē rezultātus. Rezistenci vai jutību vērtē pēc infekcijas procesa nomākšanas šūnās.

[ 46 ], [ 47 ], [ 48 ], [ 49 ], [ 50 ], [ 51 ], [ 52 ], [ 53 ]

Cik ilgs laiks nepieciešams, lai veiktu antibiotiku jutības testu?

Vidēji analīze tiek veikta 5–7 dienu laikā. Dažas analīzes aizņem ilgāku laiku. Piemēram, diagnosticējot tuberkulozi, rezultāti jāgaida no 3 nedēļām līdz mēnesim. Viss ir atkarīgs no mikroorganismu augšanas ātruma. Bieži vien laboratorijas darbiniekiem nākas saskarties ar gadījumiem, kad pacienti lūdz analīzi veikt ātrāk. Un viņi pat piedāvā "papildu samaksu" par steidzamību. Tomēr šeit ir jāsaprot, ka šajā gadījumā nekas nav atkarīgs no laboratorijas asistenta rīcības. Tas ir atkarīgs tikai no tā, cik ātri mikroorganisms aug. Katram veidam ir savs, stingri noteikts augšanas ātrums.

Normāls sniegums

Nav absolūtu universālu normas vērtību visām analīzēm. Pirmkārt, šīs vērtības var atšķirties katram biotopam. Otrkārt, tās ir individuālas katram mikroorganismam. Tas ir, normas vērtības vienam un tam pašam mikroorganismam, piemēram, rīklē un zarnās, ir atšķirīgas. Tātad, ja rīklē kā normālas mikrofloras pārstāvis dominē stafilokoki, tad zarnās dominē E. coli, bifidobaktērijas un laktobaktērijas. Arī viena un tā paša mikroorganisma vērtības dažādos biotopos var ievērojami atšķirties. Piemēram, Candida parasti var būt noteiktā daudzumā uroģenitālajā mikroflorā. Mutes dobumā tās parasti nav sastopamas. Candida klātbūtne mutes dobumā var liecināt par to mākslīgu ievešanu no dabiskās dzīvotnes.

Urīns, asinis, cerebrospinālais šķidrums ir bioloģiskas vides, kurām parasti jābūt sterilām, t. i., tajās nedrīkst būt mikrofloras. Mikrofloras klātbūtne šajos šķidrumos norāda uz spēcīgu iekaisuma, infekcijas procesu, kā arī norāda uz bakterēmijas un sepses attīstības risku.

Kopumā pastāv aptuvena klasifikācija. Mikrobioloģijā mērvienība ir CFU/ml, tas ir, koloniju veidojošo vienību skaits 1 mililitrā bioloģiskā šķidruma. Piesārņojuma pakāpi nosaka CFU skaits, un tā svārstās plašā diapazonā no 101 ^līdz 109. ^Attiecīgi 101 ^ir minimālais mikroorganismu skaits, ¹⁰⁹ ir smaga infekcijas pakāpe. Tajā pašā laikā diapazons līdz 103 ^tiek uzskatīts par normālu, visi rādītāji virs šī skaitļa norāda uz baktēriju patoloģisku vairošanos.

Runājot par jutību pret antibiotikām, visi mikroorganismi tiek iedalīti rezistentos, vidēji jutīgos un jutīgos. Šo rezultātu bieži izsaka kā kvalitatīvu raksturlielumu, kas norāda MID - minimālo inhibējošo antibiotikas devu, kas joprojām kavē mikroorganisma augšanu. Katrai personai, kā arī katram mikroorganismam šie rādītāji ir stingri individuāli.

[ 54 ], [ 55 ], [ 56 ], [ 57 ]

Ierīce analīzei

Veicot bakterioloģiskos pētījumus, īpaši nosakot jutību pret antibiotikām, viena ierīce nebūs pietiekama. Nepieciešams pilnīgs, visaptverošs bakterioloģiskās laboratorijas aprīkojums. Ir rūpīgi jāplāno un jāizvēlas aprīkojums, kas atbildīs katram pētījuma posmam. Bioloģiskā materiāla savākšanas posmā nepieciešami sterili instrumenti, kastes, kārbas, konteineri, uzglabāšanas kameras un transporta aprīkojums materiāla piegādei laboratorijai.

Laboratorijā, pirmkārt, būs nepieciešams augstas kvalitātes mikroskops uztriepes mikroskopijai. Mūsdienās ir pieejams liels skaits mikroskopu ar dažādām īpašībām – sākot no tradicionālajiem gaismas mikroskopiem līdz fāzes kontrasta un atomspēka mikroskopiem. Mūsdienu aprīkojums ļauj skenēt attēlu trīsdimensiju telpā un pārbaudīt to ar lielu palielinājumu ar augstu precizitāti.

Mikroorganismu sēšanas un inkubācijas posmā var būt nepieciešami autoklāvi, sausās karstuma skapji, eksikatori, tvaika pirtis un centrifūga. Nepieciešams termostats, kurā notiek galvenā bioloģiskā materiāla inkubācija.

Mikroorganismu identificēšanas un antibiogrammas veikšanas posmā dažādiem aprēķiniem un kultūru bioķīmisko īpašību novērtēšanai var būt nepieciešami mikromanipulatori, masas spektrometri, spektrofotometri, kolorimetri.

Turklāt mūsdienu laboratorijas var aprīkot ar augsto tehnoloģiju aprīkojumu, kas veic visus iepriekš minētos galvenos pētījumu posmus, līdz pat rezultātu aprēķināšanai automātiskajā režīmā. Šādas ierīces ietver, piemēram, bakterioloģiskās laboratorijas sarežģītu ierīci, kuras pamatā ir lidojuma laika masas spektrometrs. Šī ierīču līnija ļauj sadalīt visu laboratorijas teritoriju trīs zonās. Pirmā zona ir netīrā, kur tiek saņemti un reģistrēti testi. Otrā zona ir darba zona, kur faktiski tiek veikti galvenie mikrobioloģiskie pētījumi. Un trešā zona ir sterilizācija un autoklāvs, kur tiek veikta darba materiāla sagatavošana un utilizācija.

Modeļi ļauj inkubēt plašā temperatūru un apstākļu diapazonā. Satur iebūvētu asins un citu bioloģisko paraugu analizatoru, kas sniedz rezultātus ar augstu precizitāti un uzticamību. Komplektā ietilpst elektroniskie svari, bidestilatori, centrifūgas, autoklāvi un sterilizācijas skapji, automātiska barotnes katls, ūdens vanna ar iebūvētu maisītāju, pH metri, termometri un mikroskopi.

Tiek izmantots arī mikrobioloģiskais analizators, kurā ievieto testējamos paraugus, barības vielas un testu komplektus jutības noteikšanai. Ierīce veic nepieciešamos pētījumus un izdod gatavu secinājumu.

Vērtību paaugstināšana un pazemināšana

Analīzes atšifrēšanu var veikt tikai ārsts. Taču bieži vien pacienti, saņemot rezultātus, krīt panikā, pamanot lielu skaitu nesaprotamu simbolu un ciparu. Lai neapmaldītos, ieteicams vismaz vispārēji izprast, kā atšifrēt jutības pret antibiotikām analīzi. Parasti pirmajā rezultātos ir norādīts slimības izraisītāja mikroorganisma nosaukums. Nosaukums ir norādīts latīņu valodā. Tas var norādīt arī organismā valdošās normālās mikrofloras pārstāvi, tāpēc nav pamata panikai. Otrajā punktā ir norādīta iesēšanas pakāpe, tas ir, mikroorganismu skaits. Parasti šis skaitlis svārstās no 101 ^līdz 109. ^Trešajā punktā ir norādīta patogenitātes forma, bet ceturtajā - antibakteriālo zāļu nosaukumi, pret kuriem šis mikroorganisms ir jutīgs. Blakus ir norādīta minimālā inhibējošā koncentrācija, pie kuras tiek nomākta mikroorganisma augšana.

[ 58 ], [ 59 ], [ 60 ], [ 61 ], [ 62 ], [ 63 ]